¿Cómo podemos diferenciar Dispersión Rayleigh del espectro de fluorescencia?
Respuesta
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Esencialmente, la "dispersión" de la fluorescencia es inelástico - transfiriendo algo de energía al fluoróforo y disminuyendo la energía / frecuencia de la luz emitida en relación con la excitación - y la dispersión Rayleigh es elástico - conservando la energía y, por tanto, la longitud de onda. La dispersión Rayleigh también es muy rápida: dispersión elástica de fotones en electrones del medio y cada evento ocurre en intervalos de tiempo de femtosegundos. Un evento de fluorescencia suele durar seis órdenes de magnitud más: el tiempo de vida de la fluoresceína es de 4,5 ns). Otra forma de ver esto es que la dispersión de Rayleigh es una extensión de los procesos físicos que dan lugar al índice de refracción de un medio porque los átomos del medio son discretos, no un continuo, y la interacción entre la luz y el medio es por medio de estados virtuales. En cambio, la fluorescencia implica la transición de los electrones entre atado estados del fluoróforo. Además, en el estado elevado, parte de la energía puede acoplarse de forma irreversible a los modos de vibración y rotación del fluoróforo, por lo que éste decae a un estado metaestable a la espera del evento de fluorescencia.
